作者：廖鹏志,刘端,郑月宏 | 高糖人脐静脉内皮细胞序列相似性家族3a活性氧簇线粒体功能障碍
摘要：目的评估序列相似性家族3A（Fam3A）在高糖诱导的人脐静脉内皮细胞（HUVECs）氧化损伤中的作用。方法将HUVECs分为对照组和高糖组,分别给予5.5 mmol/L葡萄糖的内皮细胞培养基（ECM）和33.3 mmol/L葡萄糖的ECM培养,RT-q PCR法检测Fam3A mRNA的表达,ELISA法检测Fam3A蛋白的表达。分别用siNT和siFam3A转染对照组和高糖组HUVECs,检测细胞内活性氧簇（ROS）含量、ATP水平、线粒体氧耗率（OCR）和P-p38蛋白表达情况。结果培养24h后,高糖组Fam3A mRNA与对照组的相对表达量为2.52±0.19,差异有统计学意义（t=13.296,P=0.000）;Fam3A蛋白浓度为（173.82±33.28）pg/ml,明显高于对照组的（39.45±33.78）pg/ml（t=4.907,P=0.006）。siNT高糖组细胞内ROS含量为（8217±794）RFU,明显高于siNT对照组的（3982±398）RFU（t=15.109,P=0.002）;siFam3A高糖组细胞内ROS含量为（11 910±1 001）RFU,明显高于siFam3A对照组的（4171±402）RFU（t=9.705,P=0.010）和siNT高糖组（t=4.026,P=0.048）。以siNT对照组ATP合成量为基线,siNT高糖组、siFam3A对照组和siFam3A高糖组细胞内ATP合成相对值分别为（61.2±5.6）%、（94.6±8.4）%和（29.7±2.7）%,siNT高糖组明显低于siNT对照组（t=12.001,P=0.007）,siFam3A高糖组明显低于siFam3A对照组（t=20.742,P=0.002）和siNT高糖组（t=18.814,P=0.003）。siNT高糖组的线粒体OCR为（0.57±0.05）pMO_2/（μg蛋白·min）,明显低于siNT对照组的（1.12±0.09）pMO_2/（μg蛋白·min）（t=6.804,P=0.021）;siFam3A高糖组的线粒体OCR为（0.31±0.03）pMO_2/（μg蛋白·min）,明显低于siFam3A对照组的（1.01±0.09）pMO_2/（μg蛋白·min）（t=19.876,P=0.003）,也明显低于siNT高糖组（t=21.444,P=0.002）。以siNT对照组为基线,siNT高糖组、siFam3A对照组和siFam3A高糖组的P-p38相对表达量分别为2.239±0.353、0.816±0.120和1.160±0.185,siNT高糖组明显高于siNT对照组（t=6.075,P=0.026）,siFam3A高糖组明显高于siFam3A对照组�
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